固相萃取工作原理及操作步驟

標(biāo)題：固相萃取工作原理及操作步驟

工作原理：固相萃取吸附劑與目標(biāo)化合物之間的作用機理

　　固相萃取主要通過目標(biāo)物與吸附劑之間的以下作用力來保留/吸附的1）疏水作用力：如C18、C8、Silica、苯基柱等2）離子交換作用：SAX,SCX，COOH、NH2等3）物理吸附：Florsil、Alumina等

　　pH值對固相萃取的影響

　　pH值可以改變目標(biāo)物/吸附劑的離子化或質(zhì)子化程度。對于強陽/陰離子交換柱來講，因為吸附劑本身是完全離子化的狀態(tài)，目標(biāo)物必須完全離子化才可以保證其被吸附劑完全吸附保留。而目標(biāo)物的離子化程度則與pH值有關(guān)。如對于弱堿性化合物來講，其pH值必須小于其pKa值兩個單位才可以保證目標(biāo)物完全離子化，而對于弱酸性化合物，其pH值必須大于其pKa值兩個單位才能保證其完全離子化。對于弱陰/陽離子交換柱來講，必須要保證吸附劑完全離子化才保證目標(biāo)物的完全吸附，而溶液的pH值必須滿足一定的條件才能保證其完全離子化。

　　固相萃取操作步驟及注意事項

　　針對填料保留機理的不同（填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì)），操作稍有不同。

　　1）填料保留目標(biāo)化合物

　　固相萃取操作一般有四步：

　　活化----除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。（注意整個過程不要使小柱干涸）

　　上樣----將樣品用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。（注意流速不要過快，以1ml/min為宜，zui大不超過5ml/min）

　　淋洗----zui大程度除去干擾物。（建議此過程結(jié)束后把小柱完全抽干）

　　洗脫----用小體積的溶劑將被測物質(zhì)洗脫下來并收集。（注意流速不要過快，以1ml/min為宜）

　　2）填料保留雜質(zhì)

　　固相萃取操作一般有三步：

　　活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。（注意整個過程不要使小柱干涸）

　　上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱，此時大部分目標(biāo)化合物會隨樣品基液流出，雜質(zhì)被保留在柱上，故此步驟要開始收集（注意流速不要過快）

　　洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集，合并收集液。（注意流速不要過快）

　　此種情況多用于食品或農(nóng)殘分析中去除色素。